織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染；嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯合處理。

德國MB公司qPCR支原體檢測試，該試劑盒采用熒光定量PCR技術，是已建立的檢測方法，能一次檢測歐洲藥典（EP2.6.7）和日本藥典（JP G3）提到的所有支原體物種，并且能與大多數儀器配合使用。

 

該試劑盒針對支原體基因組中的高度保守區(qū)，具有快速、耐用和靈敏的特點。

該試劑盒的設計滿足歐洲藥典和日本藥典對于不同類型樣本（如軟骨細胞、血清、細胞培養(yǎng)上清）在DNA抽提后的檢測標準?？芍苯訖z測細胞上清（研究領域），或者先對細胞培養(yǎng)物富集，或先抽提DNA。該試劑盒*符合EP2.6.7和JP G3的要求。

檢測原理：

該試劑盒擴增柔膜體對應的16S rRNA上的特異序列， 而真核細胞和其他細菌DNA不會被擴增。

試劑盒說明書同時包括細胞培養(yǎng)上清篩查和遵循歐洲藥典和日本藥典檢查的流程，包括對DNA抽提和對樣本體積的規(guī)定。整個檢測小于3小時。并且與ELISA、熒光染色和培養(yǎng)法不同的是，無須活支原體。和一些生化和細胞學方法相比，PCR具有更高的靈敏度和準確性。

試劑盒包含所有必要的PCR組分，

內控DNA可用于鑒定PCR抑制或DNA抽提問題帶來的假陰性。內控DNA可直接加到PCR預混液里，或加到DNA抽提之前的樣本中。它可用于驗證DNA抽提和qPCR擴增過程。它可從Minerva廠家購買（貨號11-9905）。內控對照的擴增結果在560nm檢測（HEX通道），而支原體的擴增在520nm檢測（FAM通道）。

試劑盒包括dUTP，它替代dTTP，方便用尿嘧啶DNA糖基酶（UNG）監(jiān)視假陽性。該試劑盒不包含UNG。