細胞培養的無菌環境-無菌室和超凈工作臺

更新時間：2022-06-07 | 點擊率：1640

一、無菌室

無菌室的結構：一般由更衣間、緩沖間、操作間三部分組成。

無菌室的消毒和防污染：為保持無菌狀態，經常消毒是必要的，通常采用每日（使用前）紫外照射（1－2小時），每周甲醛、乳酸、過氧乙酸熏蒸（2小時）和每月新潔爾滅擦拭地面和墻壁一次的方式進行消毒。實際工作中，要根據無菌室建筑材料的差異來選擇合適的消毒方法。

此外，還應注意防止無菌室的污染。造成無菌室污染的可能包括：送入無菌室的風沒有被過濾除菌；進出無菌室時，能使外界空氣直接對流進無菌室的操作間；等。

二、超凈工作臺

工作原理：鼓風機驅動空氣通過高效過濾器得以凈化，凈化的空氣被徐徐吹過臺面空間而將其中的塵埃、細菌甚至病毒顆粒帶走，使工作區構成無菌環境。根據氣流在超凈工作臺的流動方向不同，可將超凈工作臺分為側流式、直流式和外流式三種類型。

超凈臺的使用與保養：超凈臺的平均風速保持在0.32-0.48米/秒為宜，過大、過小均不利于保持凈化度；使用前最好開啟超凈臺內紫外燈照射10－30分鐘，然后讓超凈臺預工作10－15分鐘，以除去臭氧和使用工作臺面空間呈凈化狀態；使用完畢后，要用70%酒精將臺面和臺內四周擦拭干凈，以保證超凈臺無菌。還要定期用福爾馬林熏蒸超凈臺。

細胞間發生支原體污染的風險較高，因為人、試劑、細胞株都可攜帶支原體。下面，筆者從預防的角度，對降低支原體污染風險提供一些建議，供參考。

1. 預防人源攜帶的支原體

1）應帶帽子、口罩、手套、白大褂，應預防個人攜帶的支原體飄散到空氣中，同時應注意個人衛生。

2）在超凈臺上操作，必要時打開酒精燈。

3）操作時盡量不說話。

2. 預防環境中的支原體

可使用德國MB公司的支原體祛除噴霧Mycoplasma Off™或濕巾Mycoplasma Off™ Wipe。該祛除劑中含有殺滅支原體的Mynox®成分。也能消除細菌、真菌和一些病毒。應定期對環境進行清潔消毒。