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細胞培養用到的血清我們到底該則么選擇?

更新時間:2022-07-02  |  點擊率:1289

牛血清是細胞培養中用量較大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必需的營養成分,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。

牛血清的作用:

1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。

2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。

3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。

4.在細胞培養試驗中是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。

5.起酸堿度緩沖液作用。

6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

要保證血清質量,需要有嚴格的質控,包括從外觀到理化性質、細胞增殖試驗和微生物檢查,制定一系列的標準,以及出廠產品能符合這些標準。



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外觀及相關物質含量


以胎牛血清為例,優質的特級胎牛血清,外觀應是淡棕色至橙色透明液體,無顆粒物沉淀。


PH在6.7-8.2之間;

滲透壓在260-340mosm/kg之間;

血紅蛋白含量小于20mg/dL;

總蛋白含量在30-50g/L;

白蛋白含量在14-34g/L;

α、β、γ球蛋白含量則以實際測量為準;

之前的文章中有詳細介紹球蛋白與細胞培養之間的關系,點擊鏈接即可查看:

牛血清中球蛋白的作用

IgG應小于250μg/mL;

內毒素含量應小于3EU/mL;

關于細胞培養過程中的內毒素,我們也有專門的文章介紹過:

內毒素對細胞的危害到底有多大?


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無菌檢測


優質的特級胎牛血清還要經過嚴格的無菌檢測確保血清無污染。


檢測項目包括厭氧菌、好氧菌、真菌(最容易污染細胞的酵母菌和霉菌都應包括在內)以及支原體檢測。檢測結果應全部為陰性,視為通過無菌檢測。


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病毒檢測


血清含病毒,會導致宿主細胞發生腫脹、壞死、脫壁,不僅嚴重影響實驗進度,更可能會對實驗人員造成威脅。


對于血清中的病毒檢測,重點放在那些曾世界大范圍爆發、人畜共患或是十分常見的病毒身上。


每個地區的法規會有些許區別,但牛副流感3型病毒(PI-3)、牛腹瀉病毒(BVD)、牛細小病毒等是任何國家和地區的檢測報告中,都應標注清楚的。


一批合格的血清,毒檢測項目均應為陰性。


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細胞生長情況


促進細胞增殖方面,也是血清一項不可忽視的指標。每一批次血清也應就克隆率、細胞毒性、細胞增殖密度、和倍增時間進行檢查。


所有檢測結果應符合相應的規范。


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抗體檢測


病毒檢測反映的是動物采血時、或血清加工過程中有沒有感染病毒,而抗體檢測則表示該供體動物在采血前一段時間內,是否感染過病毒。


優質的特級胎牛血清,應保證動物從始至終都沒有感染過相關病毒,因此檢測結果應為陰性。


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Ausbian進口特級胎牛血清


Ausbian品牌胎牛血清,每個批次均通過了嚴格的質檢,出具專業的質檢報告,品質有保障:

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2. 新批次在試用前,提供試用服務,養細胞更放心。

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