熟悉細胞實驗的小伙伴，對動物血清應該不陌生吧？

血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后，分離出的淡黃色透明液體（理論上）或指纖維蛋白原已被除去的血漿。

其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、激素和各種生長因子、結(jié)合蛋白、促接觸和生長因子，使細胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用。

其實，細胞培養(yǎng)從上個世紀開始發(fā)展至今，經(jīng)歷了多個階段：

1885年Roux生理鹽水培育雞胚組織；

1903-1906年Jolly和Beebe等發(fā)明了懸滴培養(yǎng)；

1907年Harrison培養(yǎng)蛙胚神經(jīng)成功；

1910、1912年Carrel

完善了懸滴培養(yǎng)法；

1923年Carral設計創(chuàng)立了卡氏瓶培養(yǎng)法；

隨后培養(yǎng)器具不斷推陳出新，

塑料瓶、皿、多孔培養(yǎng)板的使用逐漸普遍。

在培養(yǎng)基方面

也經(jīng)歷了巨大變革，

天然培養(yǎng)基?合成培養(yǎng)基

雞胚浸出液?動物血清

直至60年代出現(xiàn)無血清培養(yǎng)基。

而動物血清的種類，

也愈加豐富：

牛血清、馬血清、豬血清，

還有兔、雞等動物的血清，

都有它們的用武之地。

動物不同，分離出的血清也會有所不同。物種來源相同的血清，根據(jù)采血時間、血源品質(zhì)也會分出不同的類別。有些時候，根據(jù)實驗需求，還要對血清進行一些特殊的加工，因此，市面上的血清種類就變得五花八門了。

所以今天就來給大家簡單介紹一下，常見的細胞學動物血清有哪些，各自有什么特點，Let's go！

01

牛血清

牛來源的血清，可以細分為很多種：

根據(jù)采血時間分

合格的血清產(chǎn)品，需要嚴格控制采血時間點，才能保證最基本的血清質(zhì)量。以胎牛血清為例：

一旦牛胎齡過長，會導致補體系統(tǒng)逐漸發(fā)育*，進而使制備的血清中含有補體，影響血清品質(zhì)。另外，胎牛中各類生長因子也會隨著生長發(fā)育而逐漸喪失，進一步使血清品質(zhì)下降。

實驗不是千篇一律的，根據(jù)不同的需求，有時候需要對血清進行一些“定制化處理"。

根據(jù)不同品質(zhì)分

根據(jù)內(nèi)毒素含量不同，血清可以分為不同品質(zhì)：

當血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時，此血清為特級胎牛血清；

當血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時，此血清為優(yōu)級胎牛血清；

當血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時，此血清為標準級胎牛血清；

根據(jù)不同處理分

透析胎牛血清：透析過濾去除10000D以下小分子（如次huang嘌呤和胸腺核苷），避免外源小分子對細胞產(chǎn)生干擾。適合脈沖示蹤實驗（例如同位素標記特定小分子，并加入到培養(yǎng)體系中，以研究細胞代謝），也適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選等應用。

去外泌體血清：通過超速離心法去除絕大部分外泌體的血清，適用于外泌體相關細胞實驗研究。

超低lgG的血清：使用親和層析等工藝，去除IgG，使其水平低于要求值，可用于抗體、病毒和病毒反應以及細胞表面抗原表位相關研究。

活性炭/葡聚糖處理的血清：可降低血清中類固醇激素的濃度，例如雌二醇、孕酮、皮質(zhì)醇、睪酮、T3 和 T4。適用于相關激素研究的實驗。

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02

馬血清

馬血清一般分為兩種：

第一種馬血清含有的大分子蛋白比較多，適用于蛋白封閉；

第二種馬血清為細胞培養(yǎng)級別。它經(jīng)過多次過濾，祛除了許多大分子蛋白，但保留了血清中促細胞生長的活性因子，因而能用于細胞培養(yǎng)，例如神經(jīng)細胞培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中則需要添加馬血清。

優(yōu)質(zhì)的馬血清來自健康馬血液，為封閉系統(tǒng)內(nèi)無菌采血過濾而成，為淡黃色澄清液體，超低內(nèi)毒素，無溶血，無異物，無細菌、真菌、支原體、噬菌體等。

03

豬血清

豬血清，常用于豬肺炎支原體疫苗的生產(chǎn)。

在對細胞和活疫苗進行支原體檢驗中，《獸藥典》也明確推薦了豬血清作為支原體檢驗用液體培養(yǎng)基的組成成分。

并且，《獸藥典》指出在【豬支原體肺炎微量間接血凝試驗】和【豬支氣管敗血波氏桿菌凝集試驗】中需要陰性血清，即優(yōu)質(zhì)的豬血清，血源必然來自健康動物。

1989年左右，也有國外學者建議用豬血清取代牛血清，用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細胞（見《動物檢疫》 1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學診斷的假陽性反應》），原因是牛血清中的白蛋白會干擾非洲豬瘟抗體的檢測，造成假陽性反應。

04

其他動物源血清

兔血清：

兔血清通常從六個月或更小的動物身上收集，可用于與 BSA 結(jié)合用作免疫細胞化學[1]和免疫組織化學中的封閉血清[2]。

山羊血清：

多用做封閉液，也有一些研究人員發(fā)現(xiàn)，優(yōu)質(zhì)的山羊血清可用于某些細胞的培養(yǎng)[3][4]。

雞血清：

從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素 B12 的放射性同位素稀釋測定[5]。