近年來，隨著生物醫(yī)藥領域的迅猛發(fā)展，細胞治療等項目成為了生物醫(yī)藥領域的熱點。與此同時，各國法規(guī)和相關機構也在逐步加強對生物制品安全性和可靠性的監(jiān)管。其中一個關鍵問題是“如何確保生物制品在生產(chǎn)過程中沒有支原體污染"。針對涉及細胞培養(yǎng)的生物制品工藝過程，各國法規(guī)均相關的檢測要求。

傳統(tǒng)的培養(yǎng)法和指示細胞法是各國《藥典》中都認可的支原體檢測方法。但是這兩種相對“古早"的檢測手段，有難以避免的缺點：培養(yǎng)法檢測周期長、指示細胞法靈敏度低。導致生物醫(yī)藥相關企業(yè)，在生產(chǎn)或產(chǎn)品放行過程中，出現(xiàn)周期拉長的情況。行業(yè)內部對支原體檢測時效性和靈敏度要求越來越高，因此NAT方法從眾多支原體檢測方法中脫穎而出。

目前《歐洲藥典》（EP）<2.6.7>，《日本藥典》（JP）以及《美國藥典》（USP）<63>都已收錄NAT方法作為支原體檢測方法，但需要對該方法進行方法學驗證，與傳統(tǒng)方法進行對比，對比項目包括特異性、檢測靈敏度等指標，要求NAT法結果不低于傳統(tǒng)方法，才可以使用。2020版《中國藥》典（ChP）雖然并未收錄NAT法作為支原體檢測方法，但其中也提到了“也可采用經(jīng)國家藥品檢定機構認可的其他方法"。

不同藥典在特異性（Specificity）、檢測限（Detection Limit）和耐用性（Robustness）三方面進行了要求。

特異性

特異性指在其他成分（如雜質、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采用的檢測和分析方法能正確測定出待檢物種的能力。《歐洲藥典》中提到，“需要在驗證中關注與系統(tǒng)發(fā)育關系比較近的其他細菌種屬之間的交叉反應，如革蘭氏陽性菌包括梭菌屬Clostridium、乳桿菌屬Lactobacillus和鏈球菌屬Streptococcus。"

檢測限

檢測限是指樣品中被測物能被檢測出的限度。

對需要進行檢測限確認的支原體類型，試劑盒廠家需盡可能多的覆蓋法規(guī)藥典中要求的支原體類型。

耐用性

耐用性系是指，檢測條件有小的變動時，檢測結果不受影響的承受程度。比如，抑制物質實驗可檢測實驗的耐用性。

好物推薦

德國Minerva Biolabs支原體檢測系列，通過《歐洲藥典》和《日本藥典》方法學驗證，支原體DNA提取試劑盒、支原體qPCR檢測試劑盒、支原體標準品都具備。

Venor®GeM Sample 

preparation Kit

支原體DNA提取試劑盒，符合歐洲藥典的要求，從細胞上清和生物制品中，均可分離支原體DNA，全程只需30分鐘。洗脫DNA純度高，體積50μl，保證PCR的靈敏。

Venor®Gem qEP

經(jīng)典法支原體qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求；高特異性，一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體），根據(jù)序列一致性，至少可以檢測到10^7種支原體物種。操作簡單，易于觀察。

支原體標準品

涵蓋支原體靈敏度保準品（檢測限和耐用性驗證）、支原體特異性標準品（特異性）和支原體絕對定量標準品（定量檢測）三大類。